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Alkaline Phosphatase (Calf Intestine), Molecular Biology Grade小牛腸堿性磷酸酶(分子生物學級)
目錄號 MP0109-5KU 售價 3348.00元
規格 5KU 運輸溫度 -20℃凍存
其他名稱 Phosphatase, Alkaline; Orthophosphoric-monoester phosphohydrolase (alkaline optimum); 保存溫度 冰袋運輸
CAS號 9001-78-9 有效期 1年穩定
應用 分子生物學級別 訂購數量
產品簡介:

Alkaline Phosphatase(Calf Intestine), Molecular Biology Grade

小牛腸堿性磷酸酶(分子生物學級別)



產品信息

產品名稱

產品編號

規格

價格(元)

Alkaline Phosphatase (Calf Intestine), Molecular Biology Grade小牛腸堿性磷酸酶(分子生物學級)

MP0109-1KU

1KU

798

MP0109-5KU

5KU

3348


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產品內容

組分

名稱

產品貨號(規格)

MP0109-1KU

MP0109-5KU

MP0109-A

堿性磷酸酶(30 U/μl)

1000U

5×1000U

MP0109-B

10×堿性磷酸酶緩沖液

1ml

5×1ml


產品描述

堿性磷酸酶(Phosphatase, Alkaline,ALP,EC 3.1.3.1),是一種含兩個相同亞基的二聚體,也是一種約含12%碳水化合物(6%己糖和6%其他中性糖)的糖蛋白,每個ALP分子含4個鋅離子和4個二硫鍵。鎂離子存在情況下,ALP可達到最高酶活。AP能催化磷酸單酯水解,比如對硝基苯酚磷酸鹽(pNPP)、磷酸苯酯、酚酞磷酸、α-甘油磷酸、β-甘油磷酸、2- 磷酸甘油酸、磷酸丙糖、葡萄糖-6-磷酸、葡萄糖-1-磷酸、果糖-6-磷酸、腺苷-5-磷酸、腺苷-3-磷酸、磷酸烯醇式丙酮酸和β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸等。


堿性磷酸酶(ALP)常用來偶聯抗體和其他蛋白,從而滿足ELISA、WB和組織化學檢測上的應用。通常用來蛋白的去磷酸化實驗,比如酪蛋白和核酸等。當需要高檢測靈敏度時也能用來蛋白標記。還可用在DNA或RNA的5′-末端去磷酸以防止自連。經堿性磷酸酶的去磷酸化作用后,DNA或RNA還可被放射性標記磷酸鹽標記(通過T4多核苷酸激酶)。


本品是由分子量為50,000的單體組成的二聚體,活性形式為含有Zn2+的糖蛋白的金屬酶。本品是酵母重組表達的小牛腸(Calf Intestine)堿性磷酸酶,與大腸桿菌來源的酶相同,催化所有磷酸單酯的水解,不能催化磷酸二酯以及磷酸三酯的水解。達分子生物學級別,適用于去除載體DNA片段的5′-末端的磷酸基團。


活性定義

在37℃,pH9.8反應條件,每min內水解對硝基苯磷酸鹽(p-nitrophenyl phosphate, pNPP)生成1 μmol對硝基苯酚(p-nitrophenol)所需的酶量定義為1個活性單位(unit)。


保存與運輸方法

保存:-20℃凍存,1年穩定。

運輸:冰袋運輸。


注意事項

1) 本品最佳pH 8-10,最佳酶活受底物類型、底物濃度和離子濃度影響。本品正常保存穩定性很高,在螯合劑存在條件下,經65℃,30min加熱處理,99%活性不可逆失活(反應條件不同可能會有例外)。建議失活處理時使用苯酚,可使其完全失活。


2) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法【DNA的去磷酸化,僅做參考】


1、在離心管內配制下列反應液:

組分

用量

DNA fragment (in TE buffer)

1~20 pmol

10×堿性磷酸酶緩沖液

5μl

堿性磷酸酶(30 U/μl)

1~2μl

無菌超純水

定容到50μl


2、37℃或50℃反應30min。也可以先在37℃反應15min,之后再50℃反應15min。

3、苯酚/氯仿/異戊醇(25:24:1)抽提2次;

4、氯仿/異戊醇(24:1)抽提;

5、添加2.5μl的3M NaCl(終濃度為150mM).

6、添加125μl的冰乙醇,在-20℃放置30~60min,離心。

7、用200μl 70%冰乙醇洗滌DNA沉淀并干燥。

8、用≤20μl的TE Buffer溶解沉淀。


相關產品

貨號

名稱

規格

MP0101-10MG

Alkaline Phosphatase (Ammonium sulfate suspension) fromE.Coli

10mg

MP0102-5MG

Alkaline Phosphatase from Calf Intestine, EIA Grade, ≥3000 U/mg protein

5mg

MP0103-1MG

Alkaline Phosphatase (50% Glycerol Solution) from Calf Intestine, EIA Grade

1mg

MP0104-10MG

Recombinant Alkaline Phosphatase from Calf Intestine, EIA Grade, ≥7,000 U/mg

10mg

MP0109-1KU

Alkaline Phosphatase (Calf Intestine), Molecular Biology Grade

1KU




 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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